大多數(shù)實(shí)驗(yàn)室使用高壓滅菌作為他們首選的實(shí)驗(yàn)室滅菌方法,使用加壓蒸汽加熱待滅菌的材料。這是一種非常有效的方法,可以殺死所有微生物、孢子和病毒。
一、 高壓濕熱法大多數(shù)實(shí)驗(yàn)室使用高壓滅菌作為他們首選的實(shí)驗(yàn)室滅菌方法,使用加壓蒸汽加熱待滅菌的材料。這是一種非常有效的方法,可以殺死所有微生物、孢子和病毒。高壓滅菌是利用高溫飽和蒸汽的潛熱來進(jìn)行滅菌。 加壓蒸汽潛熱高;在100°C時(shí),它所持有的熱量是相同溫度下水的7倍。
蒸汽在接觸到被滅菌的物體時(shí)會凝結(jié)成水,釋放出大量的潛熱,這種潛熱能夠更有效地穿透微生物的細(xì)胞,使蛋白質(zhì)凝固變性,從而殺死微生物。
二、干熱滅菌法干熱滅菌主要是通過高溫使微生物的蛋白質(zhì)變性、電解質(zhì)濃縮引起中毒等方式來殺滅微生物。
干熱滅菌是在干燥的環(huán)境下進(jìn)行的,例如在火焰灼燒或者干熱空氣烘箱中,熱的傳導(dǎo)是通過空氣這個(gè)介質(zhì)。比如,使用酒精燈火焰灼燒接種環(huán),就是利用干熱滅菌,能迅速將接種環(huán)上的微生物燒死。
知識貼:干熱滅菌和濕熱滅菌有何區(qū)別?
干熱滅菌和濕熱滅菌都屬于物理滅菌法,是通過加熱的方式來實(shí)現(xiàn)滅菌,最終目的都是殺滅微生物,包括細(xì)菌、真菌、芽孢等各種有害的微生物,從而達(dá)到消毒滅菌的效果,保證物品的無菌狀態(tài),以滿足醫(yī)療、實(shí)驗(yàn)室等各種場合的需求。
1、滅菌原理
2、滅菌方法
3、滅菌溫度和時(shí)間
干熱與高壓滅菌的一個(gè)關(guān)鍵區(qū)別是沒有水,所以蛋白質(zhì)水解不會發(fā)生。
相反,干熱往往會通過細(xì)胞成分的氧化來殺死微生物。這比蛋白質(zhì)水解需要更多的能量,因此需要更高的溫度才能使用干熱進(jìn)行高效滅菌。
4、適用范圍
5、對物品的影響
三、過濾除菌法
過濾是無需加熱即可快速對溶液或氣體進(jìn)行除菌的好方法,主要用于血清、毒素、抗生素等不耐熱生物制品及空氣的除菌。過濾器的工作原理是將溶液通過孔徑很小而微生物無法通過的過濾器。
除菌過濾器采用孔徑分布均勻的微孔濾膜作為過濾材料,微孔濾膜分為親水性和疏水性兩種,濾膜材質(zhì)依過濾物品的性質(zhì)及過濾目的而定。
濾膜孔徑一般有0.45μm和0.22μm兩種,藥品生產(chǎn)中采用的除菌濾膜孔徑一般不超過0.22μm。過濾器不得對被濾過成分有吸附作用,也不能釋放物質(zhì),不得有纖維脫落,禁用含石棉的過濾器。
如果要過濾的溶液的量比較大,超過500ml,可以采用已滅菌的抽濾瓶,預(yù)先墊好0.22um的濾膜。抽濾瓶滅菌前要檢查封口用紗布或棉花堵牢;如果量小,用注射器加濾器、0.22微米濾膜過濾。
0.45 um的濾膜一般用于兩次過濾的第一層濾膜,以防止0.22um濾膜堵塞。
值得注意的是,病毒和噬菌體可以通過這些過濾器,因此如果這些是一個(gè)問題,過濾不是一種好的實(shí)驗(yàn)室滅菌方法。
四、使用溶劑除菌
乙醇通常用作消毒劑,但異丙醇更擅長溶解脂質(zhì),可能是更好的選擇。這兩種溶劑都是通過使蛋白質(zhì)變性起作用的,盡管該過程需要水。因此,為了有效,它們必須稍微稀釋,從100%稀釋到60-90%,剩下的%是水。
同樣值得注意的是,雖然乙醇和異丙醇擅長殺死微生物細(xì)胞,但它們對孢子沒有影響。
五、輻射滅菌法
紫外線、X 射線和伽馬射線都是對DNA具有深遠(yuǎn)破壞性影響的電磁輻射,因此它們是極好的消毒工具。就它們的有效性而言,它們之間的主要區(qū)別在于它們的滲透率。
紫外線在空氣中的滲透性有限,因此消毒只發(fā)生在燈周圍相當(dāng)小的區(qū)域。但是,它相對安全,并且對于小區(qū)域的消毒非常有用。
X射線和伽馬射線的穿透性要強(qiáng)得多,這使得它們更加危險(xiǎn),但它們對于制造過程中塑料物品(例如注射器)的大規(guī)模冷滅菌非常有效。
六、氣體滅菌法
環(huán)氧乙烷可用于對熱或濕敏感的設(shè)備進(jìn)行消毒,通常用于對導(dǎo)管和支架等醫(yī)療設(shè)備進(jìn)行消毒。
環(huán)氧乙烷基本上通過烷基化阻止細(xì)胞代謝和復(fù)制。由于環(huán)氧乙烷很容易被吸收,因此必須在滅菌后對設(shè)備進(jìn)行充氣以去除任何殘留物。
環(huán)氧乙烷具有劇毒,可能會帶來許多健康風(fēng)險(xiǎn)。由于它通常用于醫(yī)療保健產(chǎn)品,因此一般不在實(shí)驗(yàn)室中使用它。







