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二氧化碳培養(yǎng)箱污染源介紹及滅菌、抑菌方法

二氧化碳培養(yǎng)箱能否抑菌或滅菌是很多用戶非常關心的問題,病毒、真菌(霉菌和酵母菌)、細菌、支原體、非同種細胞是二氧化碳培養(yǎng)箱中主要的污染源,培養(yǎng)箱內的環(huán)境也同樣適合這些污染物的生存,細胞培養(yǎng)中大部分時間里細胞都是位于培養(yǎng)箱內,因此做好抑菌及滅菌的工作是很有必要的。

、污染物介紹:

1.病毒:由于病毒寄生生存,爆發(fā)后建議盡快和正常細胞隔離,丟棄處理,相對來說容易處理,盡管病毒污染的細胞不影響原代培養(yǎng),但生產疫苗是不安全的。因此,潛在病毒是細胞大量生產和疫苗、干擾素等生物制品制作中的難題。

2.真菌(霉菌和酵母菌):真菌生長的較慢,而細菌卻很容易被發(fā)現(xiàn),但旦發(fā)現(xiàn)有它的存在說明細胞已被污染了;目前沒有好的抑制方法,包括現(xiàn)在常用的兩性霉素,旦污染容易反復爆發(fā),尤其孢子很難殺滅。

3.細菌:細菌污染后,培養(yǎng)基1-2天就會變色,對細胞生長影響明顯,應迅速將污染細胞與其它細胞系隔離,滅菌后丟棄,還要用實驗室消毒劑消毒培養(yǎng)器皿和超凈臺。  

4.支原體:支原體污染后,因它們不會使細胞死亡可以與細胞長期共存,培養(yǎng)基般不發(fā)生渾濁,細胞無明顯變化,外觀上給人以正常感覺,實則細胞已經受到多方面潛在影響,如引起細胞變形,影響DNA合成,抑制細胞生長等,往往被大多數(shù)實驗者忽視。  

5.非同種細胞:即細胞交叉污染,由于細胞培養(yǎng)操作時各細胞株所需的器材和溶液沒有嚴格分開,往往會使種細胞被另種細胞污染。

二、二氧化碳培養(yǎng)箱滅菌技術介紹:

二氧化碳培養(yǎng)箱的滅菌技術目前主要有紫外燈照射、濕熱、消毒劑擦拭、干熱等。

1.紫外燈照射法的有效性受很多因素影響,如遮擋、時間、強度、照射距離,濕度等。

2.濕熱:通常用于高壓蒸汽滅菌中,比較少用在CO2培養(yǎng)箱上,濕熱滅菌在常壓下又叫煮沸法,煮沸的水溫般至少需為100℃,細菌繁殖體煮沸5分鐘被殺死,但芽胞常需煮沸2小時以上才可被殺死;

3.消毒劑擦拭法:主要適合于平整的表面如實驗臺面,而箱體內部設計的死角、各種器件因無法擦拭等因素導致滅菌效果也很有限,而且含氯、碘的消毒劑對于不銹鋼有腐蝕作用,不能對不銹鋼箱體進行擦拭滅菌。

4.高溫干熱空氣滅菌是如今世界公認的有效的滅菌技術,能徹底消滅所有微生物污染源(包括耐高溫的芽孢桿菌)。

三、二氧化碳培養(yǎng)箱自身抑菌設計介紹:

1.外體采用優(yōu)質不銹鋼材質,外加抗菌涂層。

2.全圓弧,完全光滑的內膽結構,極大程度上減少了污染面積;易于清潔與保養(yǎng)。

3.內壁采用拋光不銹鋼材質,研究顯示拋光不銹鋼能夠明顯降低污染物的生長。

4.HEPA高空氣過濾器設計,能夠有效的過濾掉進氣潛在的污染源和顆粒雜質。

防污染設計和消毒滅菌系統(tǒng)污染是導致細胞培養(yǎng)失敗的個主要因素,因而,二氧化碳培養(yǎng)箱的制造商們設計了多種不同的裝置去減少和防止污染的發(fā)生,其主要途徑都是在盡量減少微生物可生長的區(qū)域和表面,并結合自動排除污染裝置來有效防止污染的產生。

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